鱼病鳃丝镜检的标准化：鳃丝水浸片制作与显微镜使用的操作步骤

发表时间:2024/08/20 19:52:50 作者:袁圣浏览次数:279

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鳃是鱼的主要呼吸器官，也是容易病变的组织，对鳃丝镜检是鱼病鱼体检查的重要工作之一。鳃丝镜检应做好两个标准化，分别是鳃丝水浸片制作的标准化和显微镜使用的标准化。

一、鳃丝水浸片制作步骤(鳃丝水浸片制作的标准化)

图1鳃丝水浸片选取位置

首先准备好数片干净的载玻片、盖玻片；从图1中3部位处剪取适量鳃丝，放置于载玻片上；将剪好的鳃丝推到载玻片中间，用胶头滴管滴1滴生理盐水或池塘水到鳃丝上；将盖玻片贴着载玻片边缘轻轻往下放，直至接触到鳃丝；轻压盖玻片，使鳃丝均匀分布(图2、图3)。

图2 通过镜检可发现初期的烂鳃

图3 正确压片后鳃丝相互分离

二、鳃丝水浸片制作注意事项

选取的鳃丝最好是靠近下颌部位的，此处寄生虫相对较多。鳃丝剪取要适量，若剪取过多会导致压片不匀，鳃丝相互重叠影响观察；若鳃丝剪取过少会导致样品过少，不能真实反映鳃部情况。压片时，应适度按压盖玻片，如果按压过重会将鳃组织压碎，大量的血细胞流出，影响观察结果；按压过轻则会导致鳃丝相互重叠影响观察结果；压片的速度不能太快，若快速按压时会有大量空气被压进水浸片中形成气泡，影响观察。

三、显微镜使用的操作步骤(显微镜使用的标准化)

图4 同一视野下的显微图像，右边为调小光圈后

将组装好的显微镜插上电源，观察是否通电；将制作好的鳃丝水浸片置于载物台上，用夹子固定好，并将物镜中的低倍镜调节至观察部位；调节粗准焦螺旋，将载物台调节至离物镜最近处；调动粗准焦螺旋，将载物台逐渐向下移动，直至看见物体；调动细准焦螺旋，直至观察到清晰的图像。对观察的结果进行记录。

四、显微镜使用的注意事项

观察时先用低倍镜观察，再用高倍镜观察，先用红色的物镜，再用黄色的物镜。

图5 烂鳃

注意光圈等的调节，往往将光圈调节至最小时观察的物体最清晰，进光量过多时视野较亮，无法观察到清晰的图像(图4)。

显微镜使用的插座最好有接地线，否则带水操作时存在触电的风险。

图6 显微镜下的斜管虫

五、鳃丝观察的要点

重点观察寄生虫及鳃丝状况，烂鳃发生后需对鳃丝镜检，以确定是否有寄生虫感染(图5)。

图7 显微镜下的车轮虫

常见的寄生虫可以通过镜检发现，比如：斜管虫(图6)、车轮虫(图7)、小瓜虫、孢子虫(孢囊需被压破，才能看到里面的孢子虫)(图8、图9、图10、图11)、杯体虫(图12、图13)、隐鞭虫(图14)、中华鳋(图15)、钩介幼虫(图16)、三代虫(头部分为两叶，没有眼点)(图17)、指环虫(头部分为4叶，有4个眼点)(图18)等。