鱼类淋巴囊肿病症状及防治:最早发现的鱼类病毒病——慢性皮肤瘤
鱼类淋巴囊肿病是由淋巴囊肿病毒(LCDV)感染引起鱼类的一种典型的皮肤和浅表组织慢性病,它是最早发现的鱼类病毒性疾病。该病的普遍症状是病鱼体表长有瘤状物,严重时内脏组织器官也出现病变。鱼类淋巴囊肿病的较大规模流行最先发生在欧洲的牙鲆养殖场,随后在南美和北美的养鱼场中均暴发过;近年来开始在亚洲流行。
患病芽鲆淋巴囊肿(钟妮娜)
我国在1992年养殖的云纹石斑鱼中首次发现了淋巴囊肿病。1997年山东威海地区的牙鲆养殖场大面积暴发了淋巴囊肿病。该病通常不具有致死性,但是病鱼体质瘦弱、生长迟缓、外表异样而失去商品价值,给水产养殖业带来巨大的经济损失。
1.病原病因
病原是淋巴囊肿病毒,病因是由淋巴囊肿病毒侵入导致患病。淋巴囊肿病毒,属虹彩病毒科(病毒经过提纯结晶后,在斜射光线照射下呈现蓝紫色的虹彩光泽,故被命名为虹彩病毒)。病毒粒子二十面体,其轮廓呈六角形,有囊膜,囊膜厚约50~70nm。大小视宿主而不同,病毒核心是缠绕在一起的DNA 纤丝团,有可辨认的衣壳。在18至20℃的水中5天,冰冻干燥后在上述温度下150天及在零下20℃下两年后感染力均未丧失。能用甘油和乙醚灭活。病毒能在BF-2、LBF-1、GF-1、SP-1、SP-2 等细胞系上复制,引起细胞出现巨型囊肿细胞,且在边缘有嗜碱性胞浆包涵体,生长温度20~30℃,适宜温度为23~25℃。
患病鲈鱼尾部、鳍条与皮肤上出现囊肿物(仿Leong Tak Seng)
淋巴囊肿病可在多种海水鱼、淡水鱼中发生,发病率高达80%。感染可经由皮肤磨损处发生,在淋巴囊肿破裂或剥落后,病毒即可散出。
2.流行情况
淋巴囊肿病流行很广,在全球范围内均有发生,100多种海水、淡水鱼类均能患病,主要危害海水鱼类,特别是鲈形目、鲽形目、鲀形目鱼类苗种阶段和1龄鱼种,发病后2个月死亡率达30%以上,2龄以上的鱼很少出现死亡,但病鱼外表难看失去商品价值。该病一年四季都可发生。
患病牙鲆背部形成大量囊肿物(仿江育林)
淋巴囊肿病是一种非急性病,对寄主的影响小引起死亡少。成熟的淋巴囊肿细胞破裂后释放病毒,通过水、鳃及损伤的皮肤、鳍入侵,也可经口感染,高密度养殖和外伤会增加感染几率。淋巴囊肿病的发生与养殖水温无密切关系,而与苗种本身的体质、携带病毒及病毒的积累程度有关,在低密度和良好养殖条件下一般不会引起大量的死亡。网箱和室内水泥池工厂化养殖的感染率可高达90%以上,池塘养殖的感染率为20%~30%。一般皮肤擦伤或寄生虫机械损伤的伤口,往往成为病毒侵入的门户。
发病芽鲆
3.症状及病理变化
患病鱼类的口唇部、躯干皮肤、鳍及尾部可见单个或成群的鱼卵状或念珠状物水泡状肿胀物,尤其在背鳍、尾鳍处较多。大小不一,大的有如枣或核桃大。病灶的颜色由白色、淡灰色至粉红色,成熟的肿胀物可轻微出血。发病鱼在病情较轻时,行为摄食基本正常,但生长缓慢;病情严重时其食欲下降,甚至不摄食,并发生死亡。在病鱼的皮肤、鳍和尾部等处也会出现许多分散或聚集成团的大小不等的水泡状囊肿物,偶尔在鳃丝、咽喉、肌肉、肠壁、肠系膜、围心膜、腹膜、肝、脾等组织器官上也有发生。水泡状的囊胀物是鱼的真皮结缔组织中的成纤维细胞被病毒感染后肥大而成,并在胞浆内可见大量的包涵体和病毒颗粒。
(牙鲆发病)
淋巴囊肿病是一种慢性皮肤瘤,从外观上看近似于体表乳头状肿瘤。感染率达30%,病鱼的囊肿物多呈白色、淡灰色、灰黄色,有的带有出血灶而显粉红色部分感染的鱼体表囊肿物脱落,恢复正常并可在一定时间内具有免疫力。有的在口唇部影响进食的病鱼则需外科手术摘除,有的病鱼的囊肿可以自行脱落,病症轻的牙鲆摄食正常且有自愈现象。自愈大都发生在牙鲆大批发病的2~3个月之后,但自愈牙鲆体质弱,在运输过程中的死亡率可以超过80%,失去了商品价值。患病个体生长缓慢,体形消瘦,一是因为淋巴囊肿瘤状物对病鱼的呼吸与运动造成了障碍而影响了摄食,二是因为随着病毒侵入内脏器官,尤其是心脏与肾脏功能的降低而导致体质恶化。
4.诊断方法
从外观症状及病理变化肉眼见有瘤状物,即可基本作出初诊。但发病初期可能会与小瓜虫病、孢子虫病的胞囊容易混淆,后两者可在显微镜下检出胞囊内活动的虫体。
患病鱼体表出现大量囊肿物(仿D.W.Bruno)
确诊可用BF-2、LBF-1等细胞株分离培养病毒,通过电镜观察到病毒粒子。Nishida(1998)用ELISA检测牙鲆抗LCDV抗体,建立了LCDV的ELISA检测方法;战文斌(2007)用抗LCDV单克隆抗体对牙鲆组织中的LCDV进行间接免疫荧光检测,建立了LCDV的免疫荧光检测方法。
囊肿物压片见细胞内包涵体(仿R.Herbert)
病理组织切片:超薄切片用电镜观察,可见淋巴囊肿细胞内有大量20面体的病毒颗粒。具有厚的透明囊,在细胞中央有1个大核和核仁,胞浆内有多个嗜碱性包涵体;开始老化的淋巴囊肿细胞可能缺乏核及包涵体,但大量的嗜酸性胞浆是同质的。囊肿细胞在切片组织中相互挤压、呈不规则形;细胞和细胞核肥大化,细胞体积约为正常的100倍。直径可达100μm,有时可达1mm;细胞质内有许多嗜碱性、具网状结构、形状不规则的大型包涵体。
5.预防措施
1、鱼池进行彻底清塘消毒。
2、引进亲本、苗种应严格检疫,发现携带病原者,应彻底销毁。
3、发现病鱼及时捞出。
4、用20毫克每升聚维酮碘溶液浸浴5-10分钟。
5、有研究发现,使用中草药制剂对淋巴囊肿病毒进行预防和治疗,治愈率达80%,用于预防发病率低于10%的鱼群。Yoshimizu等研制出LCDV灭活疫苗,并证实其对牙鲆有保护作用,但是该制备方法不适合规模化生产。
6.治疗方法
1、每公斤体重用聚维酮碘(或者蛋氨氨酸碘)10毫克拌入饵料中投喂,每日1次,连续投喂5-7天。
2、每公斤体重用氟苯尼考60-80毫克,配合适量多种维生素拌料投喂,每日1次,连续投喂5-7天。
3、将病鱼囊肿割除(囊肿在量少和轻度时),并用浓度为每立方米水300毫升福尔马林浸浴30~60分钟。
4、市售过氧化氢(双氧水、H2O2)(30%浓度)稀释至3%,以此为母液,配成50毫克/升的浓度浸洗20分钟,然后将鱼放入22-25℃水温饲养一段时间后,淋巴囊肿会自行脱落,效果显著。
5、投喂抗生素药饵,每公斤饲料拌氟哌酸50~100mg或土霉素1~2g,连续投喂5~10天,可防止继发性细菌感染。
6、施用现行市售的纳米银、头孢、蛋氨酸碘等新型抗杀病毒药物。
7、本病应以防为主。受染病鱼多为无良法治疗,但皮肤患处的囊胀物有时也会自行脱落而痊愈。
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