大批量生产大银鱼受精卵及移植实用技术
大批量生产大银鱼受精卵及移植实用技术
张文明，景占明，孙 毅，姜 涛
(赤峰市农牧技术推广中心，内蒙古 赤峰 024000)
大银鱼移植分为受精卵移植和成体移植，成体移植风险大，受精卵移植风险小，受精卵质量的优劣是移植能否成功的关键。受精卵移植成功仅两年即可形成一定产量。现总结如下。
一、生产大银鱼受精卵技术
1.大银鱼产卵期的监测
北方水体11 月中旬进入大银鱼产卵前期，监测到雌鱼腹部略微膨大，卵粒Ⅲ期，雄鱼性腺不明显，体内有食物。11 月底进入大银鱼产卵中期，雌鱼腹部膨大明显，卵粒Ⅲ～Ⅳ期，但没有完全分离，雄鱼性腺白线条明显，同种残杀现象增多，食物消化部分残留。12 月初进入大银鱼产卵高峰前期，上网雌鱼30%腹部膨大饱满，卵粒分离，已到Ⅴ期；雄鱼的臀鳍两侧上方出现前大后小的两列生殖鳞，有黏性，具吸附作用，臀鳍肥大呈扇形，心脏前端出现一红色圆点，颈部及胸腹部开始变成玫瑰红色(出现副性征)。雌鱼没有副性征，食物完全消化。产卵高峰期：雌雄鱼食物完全消化，发育好的卵粒在显微镜下卵黄颗粒均匀，解剖镜下卵粒饱满圆润，每片网见1～2 条雌鱼腹部卵粒大部分排空，1～2 条雄鱼精液排净，精巢呈黑线条状，可用雌鱼卵粒完全分离，可用雄鱼性腺呈逗号形状。产卵后期：上网雌雄银鱼自产增多，雌鱼卵粒呈水样化，起网时卵粒自己流出，出网口水里卵粒增多。如强冷空气袭来，1个变温周期银鱼几乎全部自产。我国从黑龙江往南大银鱼性成熟均在12 月初到翌年3 月，产卵期也不一样。黑龙江省龙虎泡水库水面大，库湾多，雌鱼分批成熟，产卵期可持续4周左右，而水面较小的产卵期一般两周左右；产卵最适水温为2～8℃，为此，产卵中期准备工作必须提前，以免变温周期到来而错过产卵高峰期；产卵高峰前期可少量下网，挑选可用亲鱼采卵，避免影响受精卵的产出效率。
2.材料准备
砌 1 个高 33 厘米×宽 144 厘米×长 240 厘米砖池，最好搭于室内高出室外的房间里，池底用苯板做成一定的坡度，内铺塑料布，砖池水里用于暂养受精卵。1 个暂养池可养7 000 万粒受精卵，量大可多搭几个。暂养池房间要求窗户密封遮光，门上挂棉帘防寒。
量杯，水温计数只，气温计，碗，小塑料盆(漏筐也可)，两个大的圆形洗衣盆采卵用，带盖的大桶及拎库水的桶，塑料水舀子，小塑料缸，合金漏勺，橡胶手套，毛巾(不掉毛、不脱色、吸水性好)，无毒、不漏水结实大塑料袋若干。
制作好过滤库水用的圆形有兜筛绢筐，筛绢为120目，以免库水里有剑水蚤、水蛭可能啃食卵膜；制作好漏下受精卵的圆形有兜过滤筐，用25 目尼龙无结网布，网眼大小可根据受精卵大小适当调整，以受精卵漏下落入水里而内脏等杂质不漏过为原则。
3.亲鱼的捕捞
一般北方水体都采用网高1～2 米、长100 米的挂网。极少数当年性腺没成熟或者产后吃进食物的个体可成为该水体翌年的大条，大条抢食能力强，最先成熟。捕捞工人先用8毫米和9毫米大眼挂子捕大条，中小条用6 毫米和5 毫米的网眼，大银鱼夜间活动频率高，摄食能力强，性成熟的大银鱼集群沿水体边浅水区域游动，寻找产卵场，深水区多是正在摄食或没有消化净食物、没完全成熟的个体，一般有经验的捕捞工人都寻找浅水区产卵场并在附近下网。北方12 月气温极低，特别是凌晨起网，出水时直接把网放到有塑料袋的保温箱里，并盖上棉帘子防止亲鱼冻硬。捕捞亲鱼下的多是漂网，上纲绑上气球，防止随着气温变化上纲粘在冰层下；下完网在冰眼处插上小红旗，防止下雪找不到冰眼没法起网。亲鱼先上网、先死亡，看银鱼上网的密度，适当调整下网起网的次序和数量。
4.亲鱼的挑选
大银鱼的人工采卵受精是流水作业，各环节有序进行效率才高。摘鱼屋内铺上塑料布，防止鱼体粘脏；房梁上两边下坠铁线和挂钩，挂上铁横杠，运回亲鱼网后挂网上纲穿进横杠上，撑开网衣网眼。挂网网丝常卡在雌鱼性成熟腹部膨大处或雄鱼精巢臀鳍处，摘时特别注意，让技术好的工人先把网上成熟好能用的亲鱼摘下来，要雌雄分盆放置，鱼体发白脊索僵硬的，在电子显微镜下卵子和精子几乎全部死亡，弃之不用，这样就能缩短时间，保持亲鱼鲜活度和受精率。
5.采卵、采精
大银鱼采卵、采精就是人工授精过程，一般采用干法授精，雌雄比为1∶(2～3)。
(1)采卵前一天用带盖的桶拎远离码头(机船漏机油)库区的水，放入几个大桶内，水温控制到2℃，温度高可用干净明冰降温。暂养池也要注入用过滤筛绢过滤好的库水，放入水温计，准备第二天放卵，水温控制低于2℃。
(2)采卵当天准备好盛受精卵的卵盆，放入2℃筛绢过滤好的库水，放上过滤受精卵网筐，网布没入水中，放入水温计；采卵受精用水的水盆也同样放入2℃筛绢过滤好的库水，放入水温计。采卵屋里因气温高、取暖设备等原因水温会升高，用明冰放入大塑料袋里系死或冰瓶(防止明冰化水带进泥沙，防止受精卵粘冰上)降温，两个盆水温不能高于2℃。
(3)先把几条雌鱼的卵粒挤到碗底，再把几条雄鱼的精液挤到碗底的卵堆上或雌鱼的臀鳍上，挤完雄鱼依次把雄鱼尾部放在碗底卵堆上。技术关键：不管什么手法，卵粒和精液都不经过手加温，卵粒和精液不能粘在碗边上，雄鱼的精液要完全挤干净。每碗为一组，雌雄比例、数量看鱼体大小、多少等实际情况而定，原则上让成熟卵都受精。最后攥起全部雄鱼头部用小塑料缸加入受精用水搅拌均匀，切忌不加水前用雄鱼搅拌，那样会伤卵，每碗加水不要过多，以免降低精子在碗里的浓度，在水里精子游动到卵子卵门处钻入，成熟的卵子就受精，鱼卵一旦受精后，卵膜发生皮质反应会变硬或变强韧，受精卵在受精30 秒后吸水膨胀即形成动物极和植物极，这是大银鱼受精卵变成沉性卵的开始，受精的卵粒人眼观察较不受精的卵粒明亮。每碗静置5～10 分钟，多采几碗后前面几碗受精时间到，戴上橡胶手套把前面几碗倒入盛卵盆的水里，受精的银鱼卵吸附性极强，在水里转动碗，把吸附在碗里的受精卵洗到过滤网筐里。碗不要倒得太多，受精卵变成沉性卵后，自然从网眼掉入盛卵盆过滤网下，用合金漏勺把过滤网上雄鱼捞出，过滤网筐上面常黏附内脏等杂质，过段时间抖掉，以免堵住网眼，影响后续使用。盛卵盆卵层太厚要适时换盆。南方采卵没有冰块，可用冰柜在塑料袋、塑料瓶里加库水人工制冰。
6.洗受精卵
盛受精卵盆上虽然有过滤网筐过滤，但是卵巢和精巢里的组织碎片、内脏碎片、食物残渣、雄鱼体表黏液等细小颗粒，以及雌鱼没有受精的卵粒(空卵)也会进入盛卵盆水里，呈浆白色，加入2℃筛绢过滤好的库水，有经验的采卵人员可把没受精空卵及杂质撇掉，洗卵就是初次筛选的过程。
7.计数
把洗好的受精卵用量杯过数，均匀洒到暂养池水里。大银鱼受精卵全国公认出售标准是毛卵2 000粒/毫升。大银鱼受精卵比水重，1 000毫升是1.1千克，1亿粒受精卵大于55千克。养殖水体如果大银鱼分布密度小、饵料丰富则亲鱼个体就大，每个卵粒体积也大；反之则小。水温上升快，受精卵发育也快，其体积也会逐渐增大。
8.养卵
每个暂养池随着放入受精卵数量的增多，卵层加厚到1厘米，近7 000万粒，注入过滤好的2℃库水，高度加深到25厘米，保证溶氧不低于5.0毫克/升，每天用水温计监测水温，要特别关注当地的天气预报，每天上午10点-下午2点前水温会升高，用干净明冰或冰瓶降温；重点监测夜间11点-凌晨6点，室温降到3℃时，用电热器升温，电热器不能照射暂养池上方，避免红外线伤害受精卵。虽然暂养池养卵换水相对比小器皿麻烦，但是暂养池的水体大，温差变化缓慢，水温可一直保持在1～2℃，不可高于2℃；大银鱼受精卵细胞分裂发育最适宜温度是2～8℃，最好控制受精卵单细胞不发育；北方水库放到库底3～4℃水里恒温发育；暂养池水温增高，刺激细胞分裂加快，容易造成仔鱼畸形，或者加速受精卵死亡。鱼是变温动物，就是在南方水体底部7～8℃恒温环境中，大银鱼受精卵组织胚胎发育也是有时限的，同时暂养池水温升高易加速水质变坏。有时采卵和养卵过程中加生理盐水或者葡萄糖，会伤及受精卵的卵膜，显微镜下发现受精卵的卵膜绒毛增多、边缘浑浊，究其原因：一是没有完全发育好的卵粒已经受精，卵膜破裂逐渐死亡；二是有相当比例的受精卵卵膜发生变化，可能是水霉病。为此一定要适时换水、提前预防。换水时，橡胶软管一头放入过滤水筛绢网筐内，虹吸老水放到室外，这样防止将暂养池里好的受精卵吸走，吸到一定高程，可将苯板缓坡下端砖打开，用铺的塑料布多出的部分垒出一个小池子，把暂养池里空卵、死卵及杂质吸走；换掉老水后，把砖按原样砌好，提起苯板缓坡上端塑料布，把受精卵堆提到下边一点(防止新水刺激受精卵膜)，加入过滤好2℃的新库水后，用塑料水舀子泼水使受精卵均匀分布。换水不要太勤，温差控制不好、经常刺激卵膜容易促进其发育。受精卵暂养时间不要过长，最好一周，及时出售或回投。暂养受精卵是多次筛选和去杂的过程。受精卵养好的标准是：暂养池水里有波动卵不上浮，倒入水中迅速下沉，放入盆中能一次把水撇净，因受精卵之间有吸附作用，受精率极高的受精卵像白砂糖一样粒粒吸附，而称之为起“沙”。
二、受精卵的移植
1.运输
大银鱼受精卵适应能力较强，无论是充氧密封运输、还是不充氧敞口运输皆可。干法运输离开水，保温箱中温度没法控制；空运、火车运输经过X光机伤卵，投放比较麻烦。一般采用塑料袋充氧密封装运，40厘米×70厘米塑料袋每袋装卵1 000万粒，可根据运输时间考虑装卵密度，水多加点，温差变化慢，充足氧后绑紧塑料袋口，防止氧气漏出，用双层塑料袋保险，卵袋放入保温箱中，外加碎冰块，用胶带密封好后汽运。在运输过程中，一定要注意温差及尽量缩短运输时间，提高成活率。
2.选址
因大银鱼胚胎发育是在水底部进行的，北方遇见极寒冬天，冰层厚1.3～1.5米，离岸边近，水太浅，受精卵孵化空间有限；南方明水的水体如水太浅，风浪大，水体底泥波动大，泥沙容易盖住受精卵，所以投放点应选择避风、向阳岸边2.5～3米水深的地方，投放点水底以泥沙或沙砾底且轮虫等小型饵料生物比较丰富的库湾最好，要多选择投放点，以免投放不当造成失败。
3.网箱制作
大银鱼受精卵孵化，采用网箱孵化比较保险，好处在于可防止凶猛性鱼侵入吃卵，或大鱼靠近搅动底泥盖住受精卵，直接影响出苗率。
(1)北方冰层厚的水体，可制作无上盖4米×1米×3.1米的网箱，每箱可放卵1 000万粒，卵层厚度1.25毫米左右，网箱窄便于投卵操作。用冰镩(或油锯)打开冰槽，网箱四底角用网布包裹大石块固定住(冰底无风浪)，网箱底网布用密眼无结网布，防止沙砾漏出，网箱四面网布网眼以投卵水体里麦穗鱼钻不进去为原则，千万不能太密；四面网衣上边用冰水粘在冰槽四面，不要扯得太紧，保证网衣网眼撑开，便于银鱼苗钻出，下好网箱后，向网箱底部均匀放入10厘米左右厚不带土的本地沙砾，这样人工产卵场就形成了。所需网箱必须在投卵前两天放入水中，沙砾和养殖水体同温则不粘卵。北方冰层厚的水体不担心网眼被藻类堵住，到寒露节气浮游植物全部死亡，翌年清明前后开河，12月末投的银鱼卵经过40天以上的孵化，银鱼苗早已从网箱钻出。
(2)北方冰层较薄水体，如河北省、辽宁省、天津等地，可制作有上盖的4米×1.5米×3米网箱，有上盖防止野杂鱼进入网箱吃卵，每箱可投放受精卵1 500万粒，卵层厚度1.25毫米。气温升高，较薄冰层被风吹开，形成水浪，这就要求网箱底四边用粗檩子做框架撑开且锚住，上面网盖四边用粗竹竿框架住，网箱底及网箱四面从底往上1米处，用80目尼龙筛绢或细纱布制作，防止起风浪使卵粒漂到网箱外，其余部分网衣网眼以投卵水库里的麦穗鱼钻不进去为原则，不能太密，同样提前两天放入本地不带土沙砾厚15厘米左右，人为造就产卵场。南方明水区也适用。
4.投卵
投卵前看天气预报，最好选择无风晴朗天气，一般凌晨或傍晚冬季少风。冰层厚的北方水体，卵运到之前，先用冰镩剔开网箱上的冰层，用网抄子捞净网箱里的碎冰，防止冰粘破卵膜，投放时先将卵袋浸入网箱水中，同化温度，待同温时将盛卵的大塑料袋打开灌满库水，用剪刀剪开卵袋一角一个小口，拽住塑料袋沿网箱四周均匀移动，切忌离开水里，否则卵遇冷空气会冻硬。对冰层薄水体及南方水体也适用。
5.日常管理
北方冰层厚的水体，下雪天及时清扫网箱上冰层的雪，防止缺氧；冰层薄水库或南方水库，根据水质情况定期检查鱼卵发育情况和洗涮网箱的网眼，防止缺氧，避免网眼堵住影响鱼苗的钻出，经过40天左右，南方水体水底水温较高，时间相对短些，鱼卵破膜后先垂直游动、后平游，银鱼苗钻出网箱。
三、问题与讨论
大银鱼受精卵移植常见下列几种情况。
1.春季站在水体边看大银鱼苗密密麻麻，10月每对拖船网产量较低，如山东省平邑县唐村水库、山东省新泰市东周水库
笔者认为一是水面不太大，水面库湾很少；二是水库都有防洪、灌溉、发电任务，拦鱼栅网眼都是大的，大银鱼逆水游动能力相对较弱，大部分顺流而下了。而吉林省二龙湖、查干湖水面十分大，饵料资源丰富，这样的水面连年都有很大捕捞产量，是因为水面库湾很多，输水洞放水，水面几乎没波动，银鱼大部分在库湾觅食。
2.连续多年有捕捞产量后，再怎么投卵也不出了
赤峰市阿旗哈日朝鲁泡子连续9年大银鱼有捕捞产量，最多1年，11 000亩水面捕捞出150多吨大银鱼，单产15千克/亩，第10年，大银鱼突然没有了。调查发现，该水面没有长年注水河流，仅靠雨水汇流，周边牧区冲进牛羊粪肥水，浮游动物饵料丰富，但没有多少花鲢等大型鱼，小型鱼虾也很多，所以单产很高。后期，随着连年干旱水分蒸发，水体pH达11，碱度13毫克/升，高盐碱让小型鱼虾都难以存活，大银鱼也在所难免。
3.大银鱼连续多年有捕捞产量，以后减少了
吉林省通榆县向海一库，承包人在连续6年银鱼高产量的前提下，想大型鱼和小型鱼双丰收，第6年拖过大银鱼后投放1～1.5千克/尾大量花白鲢鱼种，投放大银鱼受精卵数量不变，翌年大银鱼没有捕捞产量，又连续投两年卵，还是没有捕捞产量。发现马口鱼、红鳍鲌肚里全是大银鱼后，冬季高强度捕捞花白鲢，夏季高强度捕捞马口鱼、红鳍鲌，再投放大银鱼卵，又连续两年恢复了大银鱼产量。
4.下挂网大银鱼挂上特别多，每对拖船却较少，拖网经常撕开口子
可能是水库底树桩等杂物没清理干净，笔者认为移植大银鱼受精卵要慎重选择水面，选择有注水河流的水体；以浮游动物为主要食物的中上层大型鱼花鲢等，以浮游动物和小型鱼虾为主要食物的中上层鱼如马口鱼属、狗鱼属及雅罗鱼属等和中上层凶猛性鱼及底栖性乌鳢、鲇鱼等，则可能对大银鱼形成优势种群构成威胁，一定要控制其数量；以小型鱼为食的河蟹水体也要慎重。同时还要种植有利于虾生长的部分水草，适当与别的水库交换大银鱼受精卵，以防造成大银鱼近亲繁殖出现不利因素，体表黑条斑增加，控制大银鱼捕捞量，留足亲鱼，维持大银鱼的绝对种群数量。仅靠天然产卵不能保证持续形成产量，要适当回投一定数量的大银鱼受精卵，才可能连续产生丰厚的回报。
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