斑点叉尾的病毒病及其防控方法

斑点叉尾的病毒病及其防控方法

陈昌福 张喜贵 孟长明 王鹏帅

(1.华中农业大学，湖北 武汉 430070；2.新乡市康大消毒剂有限公司，河南 新乡 453700)

一、病原

病毒粒子从内到外分别为：双链DNA核酸、衣壳(capsid)、被膜(tegument)、囊膜(envelope)和糖蛋白(glycoprotein)。病毒粒子大小为175～200纳米，外层囊膜内含有一个直径约100纳米的二十面体核衣壳，由162个壳粒组成。

二、症状

患这种疾病的鱼皮肤及鳍条基部出血、腹部、肌肉组织有许多小的出血点。鳃苍白暗淡，有时有轻微的出血。鳃丝苍白或出血，一侧或两侧眼球突出；腹部膨大，部分病鱼可见肛门红肿外突，约有1.0%的病鱼嘴部和受伤的背部会引起黄色坏死区域(图1)。

图1 患斑点叉尾病毒病的病鱼

解剖检查，肌肉、肝、肾、脾等组织有出血区，脾脏往往呈浅红色、肿大；胃膨大，有黏液分泌物；肠灰白色等病理状态。在病鱼的体腔可以发现黄色和淡血色的液体。消化道无食物，但是可能充满黄色的液体。肝和肾苍白并且有少量的出血。脾通常是黑色并且有扩大的现象。使用显微镜检测时，发现病毒引起的损伤主要在肾脏，肾的分泌和造血部位可以看见出血和死的组织。在腹腔和别的部位，液体的积累主要由肾衰引起；同时，造血组织的破坏和出血导致鳃部、肝和肾的表面苍白。脾、肝、肠道、胰腺和脑的损伤要小。炎症细胞侵入受疾病侵袭的区域，试图清除被损伤和感染的组织。

三、流行规律

CCV的传播途径有水平传播和垂直传播两种。水平传播是通过水或寄生虫及污染物传播。水温是重要的条件致病因素，暴发流行的最佳水温为25～30℃，其中27℃时的死亡率较高，低于18℃时死亡率明显下降甚至无死亡。此病主要流行于北美，目前我国虽然开展大规模的斑点叉尾养殖，但由于未进行流行病学调查，因此该病的分布、发生情况尚不清楚。

四、诊断

根据流行病学、临床症状和病理变化可作初步诊断，确诊需进一步做实验室检测。

实验室检测时单由PCR检测病原阳性结果的视为可疑。CCVD的诊断首先经细胞培养进行病毒分离，然后用中和试验、免疫荧光、ELISA或PCR鉴定。在细胞培养时，可取病鱼肾脏和脾脏，接种到斑点叉尾卵巢细胞(channel catfish ovary，CCO)，在25～30℃培养并进行分离病毒；也可以用免疫荧光或ELISA直接检测病鱼组织，快速诊断有临床症状的鱼。由于病毒仅在急性暴发期间比较容易检测到，目前尚无适合检测无症状健康鱼潜在感染的最佳方法，要排除CCV的存在，在疾病继往史和CCV血清学检测等大量工作后才能确定。

五、防治

该病目前尚无有效的药物治疗方法，故需要以预防为主。有效防治该病应该从以下几个方面入手：①消毒与检疫。消毒与检疫是控制CCVD流行的最有效方法，采用氯制剂作为消毒剂时，有效氯含量达到20～50毫克/升时可以很好地杀灭CCV。因此，可用氯制剂加强对养殖水体、鱼体和渔业用具的消毒，同时严格地执行检疫制度，控制CCVD从疫区传入非疫区。②避免采用感染了CCV的鱼体作为亲鱼进行繁殖。由于CCV感染亲鱼后，可通过垂直传播感染鱼苗、鱼种。因此，只有选用无抗CCV中和抗体和没有CCVD病史的亲鱼用于繁殖产卵，进行繁殖。③降低水温，终止CCVD的流行。在CCVD流行时，引冷水注入发病池塘，降低水温到15℃以下，可终止CCVD的流行，达到降低病鱼死亡率、减少CCVD所造成的经济损失的目的。④防止继发感染。在CCVD流行时，可在饵料中添加适量的与柱状黄杆菌敏感的抗生素，防止细菌继发性感染而加速病鱼的死亡。⑤减少应激，给予充足的溶氧。在CCVD流行时，应注意保持好的水质，溶氧应尽量保持在5.0毫克/升以上，同时应避免一些应激性的操作，如拉网作业等，以降低病鱼的死亡率。特别注意的是，在鱼病暴发时，尽可能地避免拉鱼和运鱼。⑥免疫防治。目前，国外已研制了灭活疫苗、弱毒苗和亚单位苗，试验证明都具有较好的免疫保护作用。但是，都因为成本较高或免疫途径不方便，而没有得到很好的推广与应用。有研究结果表明，在饲料中添加酵母多糖等免疫调节剂或对斑点叉尾注射多聚次黄甙和胞嘧啶核苷酸(poly I∶C)可以增强斑点叉尾对CCV的抗感染能力。Vanderheijden等(1996)构建了CCV的减毒株疫苗并申请专利；Nusbaum等(2002)将ORF59和ORF6重组构建表达载体疫苗，发现该疫苗在实验条件下，对鱼体有较强的保护力。我国迄今为止还没有预防这种疾病的疫苗应市。