水产养殖水体中的“弧菌“

      你知道吗？奠定了欧洲文明基础的古希腊居然是毁于一场闻所未闻的大瘟疫；罗马帝国的命运居然也是由大瘟疫而改变；令人难以置信的是，在战争之外居然还有另外一场恐怖的大战-- 瘟疫。更令人难以置信的是，中国东汉末年三国鼎立局面的形成、基督教的兴衰、文艺复兴时期的到来、拿破仑命运的转折，居然也都掌握在一只看不见的黑手 --大瘟疫上。了解大瘟疫的发生历史，我们也许可以找到使人类远离瘟疫的方法。
      那么对于水产养殖朋友们来说，了解弧菌的特点也许能让我们更好的防御病害的产生。今天让我们深入的了解这些横行于水产业的霸主究竟是何面目。
      弧菌科介绍
     外观：菌体短小、弯曲成弧形或直杆状、具有一端单一鞭毛、运动迅速；
     革兰氏染色：革兰氏染色阴性；
     呼吸：兼性厌氧，发酵葡萄糖，大多数菌株氧化酶阳性；
     生长需求：许多菌株生长需要2%~3%氯化钠；
     分布：弧菌科细菌广泛分布于自然界，以水中最为多见，其中有一些种对人类致病。
     弧菌科家族成员
     弧菌属（Vibrio）
     气单胞菌属（Aeromonas）
     邻单胞菌属（Plesiomonas）
     发光杆菌属（Photobacterium）
     发光杆菌属主要存在于海水中，对人类不致病
     弧菌属
     常见的弧菌属有36种，其中致病性弧菌就有12种，其中副溶血弧菌、溶藻弧菌、霍乱弧菌等最为常见。
     菌落特征：
     在TCBS平板上，呈黄色的菌落有可能是溶藻弧菌、麦氏弧菌或霍乱弧菌等，呈米黄色的有可能是河弧菌，绿色是副溶血弧菌。在科马嘉弧菌显色琼脂上，粉紫色菌落可能是副溶血弧菌，白色菌落可能是溶藻弧菌，蓝色或绿色菌落的可能是霍乱弧菌、创伤弧菌或其他弧菌等。（2012 杭莉 ）
      副溶血弧菌
      具有嗜盐性（halophilic）
      对酸敏感，在普通食醋中5分钟即可杀死；
      对热的抵抗力也较弱；
      对水产养殖动物的危害极大；
      主要引起食物中毒和急性腹泻、还可引起伤口感染和菌血症。
      培养特性
      营养要求不高；
      需氧或兼性厌氧；
      在无盐培养基上不能生长，最适合生长的氯化钠浓度为3.5%，超过8%不能生长；
      最适pH为7.7~8.0，但pH9.5时仍能生长，最适生长温度为30~37℃。
      抵抗力
      抵抗力弱；
      不耐热，90℃ 1min即被杀死；
      淡水中不超过2日，但海水中能存活47天以上；
      耐碱怕酸，1%醋酸或50%食醋中1min死亡。
      致病因子：TDH、TRH以及菌毛
     最适宜的培养基：
     温度为30℃—37℃，含盐2.5%—3%(若盐浓度低于0.5%则不生长），pH值为8.0—8.5。当pH6以下即不能生长，在固体培养基上菌落常隆起，圆形，表面光滑，湿润。在3%一3．5%含盐水中繁殖迅速，每8～9min为一周期。对高温抵抗力小，50℃ 20 min；65℃ 5 min 或80℃ 1 min 即可被杀死。能够还原硝酸盐。本菌对常用消毒剂抵抗力很弱，可被低浓度的酚和煤酚皂溶液杀灭。
分布极广，主要分布在海水和水产品中，我国华东地区沿岸的海水的副溶血性弧菌检出率为47.5%~66.5%，海产鱼虾的平均带菌率为45.6%~48.7%，夏季可高达90%以上。除了海产品以外，畜禽肉、咸菜、咸蛋、淡水鱼等都发现有副溶血性弧菌的存在。
      创伤弧菌和灿烂弧菌
      创伤弧菌(海洋弧菌)、灿烂弧菌，两种弧菌是海水养殖鱼类危害较大的弧菌。目前报道的主要是危害黄姑鱼、卵形、鲳鲹、大菱鲆、石鲽、鳗鲡和军曹鱼等 。
      据报道，研究人员研究了22味中草药对创伤弧菌(Vibriovulnificus)和灿烂弧菌(V.splendidus)的体外抑菌作用。结果显示，22味中草药对其均有不同程度的抑制作用；其中,黄连和连翘对创伤弧菌的抑菌和杀菌效果最好，最小抑菌浓度分别为0.49mg/mL和1.95mg/mL，最小杀菌浓度与最小抑菌浓度相同；黄连、黄芩、连翘和黄柏对灿烂弧菌的抑菌和杀菌效果较好，最小抑菌浓度分别为0.98、1.95、1.95和3.90mg/mL，最小杀菌浓度分别为0.98、1.95、1.95和7.81mg/mL。（闫茂仓 2010）
      溶藻弧菌
      1、是弧菌属细菌中耐盐性最强的致病菌，为嗜盐性弧菌之一，耐盐30-100g/L。
      2、是一种常见的海洋伺机性病原体，是引起人类、水生动物细菌性疾病的重要病原之一。其数量居海水类弧菌之首。
      3、因其生物学性状有许多与副溶血性弧菌相似，在《伯杰氏细菌鉴定手册》第8 版（1974）中将其列为副溶血性弧菌生物I 型菌（副溶血弧菌为生物l 型）。
      4、它也是鱼、虾、贝等海水养殖动物的一种条件致病菌，当环境恶化时机体免疫机能下降，溶藻弧菌病容易爆发，特别当水温在25～32 ℃下容易流行，因此养殖动物的溶藻弧菌病多发生在夏季，爆发时往往会造成水产养殖业巨大经济损失。（范淑宾 2012）
      抗生素的耐药性
      溶藻弧菌对青霉素类和糖肽类抗生素有很高的耐药性；对头孢4代、β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合剂、喹诺酮类、大环内酯类抗生素及氯霉素均100.0%敏感；头孢1~4代的耐药率虽不是持续降低，但药物敏感性不断增高；对同类抗生素的耐药性也有很大不同，如氨基糖苷类的庆大霉素和丁胺卡那霉素，耐药率分别为15.2%和72.7%；某些抗生素虽然耐药率不高，但也不敏感，处于中介敏感范围，如头孢噻吩、头孢呋辛和复方新诺明（胡珑玉2013）。
      如何鉴别溶藻弧菌
      溶藻弧菌会分解TCBS平板中的蔗糖，使其菌落呈黄色，但培养时间超过24h后，部分菌落会变成绿色，这是由于培养基中的蔗糖被消耗完全所造成的，因此在使用TCBS培养基对溶藻弧菌进行分离时，应选择在37℃生长24h内的典型菌落。同样能够在TCBS平板上形成黄色菌落的弧菌还包括霍乱弧菌、鳗弧菌等，但通过CV培养基上的菌落形态、10% 嗜盐性试验和ONPG试验基本可以排除。因此，在对溶藻弧菌进行分离鉴定时，可先用TCBS和CV平板进行选择性分离，再用革兰氏染色、10%嗜盐性试验和ONPG试验这三种重要的生理生化指标进行初步筛选，最后采用分子生物学方法验证，可在保证分离的准确性的同时减少鉴定的工作量。
      鳗弧菌
      鳗弧菌为有鞭毛的革兰氏阴性细菌，无荚膜，不形成芽孢，能运动，氧化酶阳性，对O/129敏感。葡萄糖氧化反应呈阳性，具有典型的弧菌属细菌特征。当水产养殖动物在不良的环境条件下，遭遇不利刺激或是受伤时，会诱发疾病的产生。鳗弧菌引起的水产养殖动物疾病在世界范围内流行，可感染鲑鱼、虹鳟、鳗鲡、香鱼、鲈鱼、鳕鱼、大菱鲆、牙鲆、黄鱼等。鳗弧菌是条件致病菌，当水产养殖动物在不良的环境条件下，遭遇不利刺激或是受伤时，会诱发疾病的产生。
      感染鳗弧菌后的鱼虾会表现出病情逐步加深的症状，有研究学者报道，部分感染鳗弧菌的鱼体表最初出现局部褪色，鳍条、鳍基部及鳃骨下部充血发红，肛门红肿，继而肌肉组织有弥撒性或点状出血，体表发黑，鳍部出现溃烂；解剖检验时有明显的黄色粘稠腹水，肠粘膜组织腐烂脱落，部分鱼肝脏坏死。
      哈维氏弧菌
      哈维氏弧菌( Vibrio harveyi ) 是引起水产动物特别是海水鱼类流行性疾病的一种重要病原,曾经在世界范围内引起海水养殖虾类疾病 ,也引起海水养殖鱼类的流行性疾病爆发。
      拟态弧菌
      拟态弧菌(V.mimicus)与不典型的霍乱弧菌关系密切，其形态学、DNA序列及性质与霍乱弧菌极相似，但生化反应不典型， 1981年从腹泻患者粪便中检出该菌，故由国外学者命名为"拟态弧菌"。
      拟态弧菌系革兰阴性弧菌，具有单鞭毛，有动力，与副溶血弧菌、霍乱弧菌一样属正常海洋菌丛，广泛存在于自然界河水、海水和海产品中。菌株在不含钠或仅含1%氯化钠的营养肉汤中生长良好，可自水生动物中分离出来。
       气单胞菌属和邻单胞菌属
       氧化酶阳性，端鞭毛、革兰阴性杆菌、兼性厌氧。
       根据表型特征，伯杰系统细菌学手册（第一版）将其归为弧菌科。
       水产养殖水体中弧菌的危害不言而喻，从根本上来说，是养殖环境生态系统的崩溃造成了弧菌的大爆发，并最终导致养殖动物发病死亡。